Transcriba
W badaniach biologii molekularnej ogromnie istotnym etapem jest skuteczny proces odwrotnej transkrypcji RNA w komplementarny DNA (cDNA). To właśnie cDNA stanowi podstawę dla wielu zastosowań, od analizy aktywności genów aż po tworzenie bibliotek genomowych. W tej skomplikowanej operacji zasadniczą rolę odgrywa Transcriba - odwrotna transkryptaza pochodząca z wirusa białaczki myszy (M-MLV). Jest to enzym niezwykle wszechstronny, zdolny do współpracy z różnymi rodzajami materiałów genetycznych i znajdujący zastosowanie w różnorodnych badaniach.
Zastosowania Transcriby:
- W konstrukcji bibliotek cDNA odgrywa ona kluczową rolę, ułatwiając zrozumienie profilu aktywności genów oraz funkcji genomu.
- Podczas syntezy pierwszej nici cDNA, Transcriba pozwala na transformację RNA w komplementarny DNA, co otwiera drogę do dalszych analiz, jak PCR, klonowanie czy sekwencjonowanie.
- W testach RT-qPCR, który służy do ilościowej analizy aktywności genów, Transcriba inicjuje odwróconą transkrypcję RNA w cDNA, które jest następnie amplifikowane i ilościowo oceniane w czasie rzeczywistym w reakcjach PCR.