JO-FI™ komórki kompetentne
Wysokowydajny szczep do każdego rodzaju klonowania i standardowej transformacji plazmidowym DNA. Stabilna replikacja plazmidów wysokokopijnych.
Numer katalogowy | Wielkość | Cena netto | Ilość | ||
---|---|---|---|---|---|
1033-20 | 20 szt. |
| Instrukcja | MSDS | |
1033-40 | 40 szt. |
|
Zalety produktu
- Wysoka efektywność transformacji: 5–6 x 10⁹ cfu/µg pUC19 DNA
Specyfikacja
- Oporność na tetracyklinę (15 µg/ml) i streptomycynę (25 µg/ml).
- Represor lacIq pozwala na ścisłą kontrolę ekspresji z promotorów trc, tac i lac zależną od obecności IPTG.
- Delecja lacZΔM15 pozwala na selekcję rekombinowanych klonów w kolorze niebieskim (LA + X-Gal).
- Mutacja w rejonie genu recA1 zmniejsza częstotliwość występowania niepożądanych rekombinacji podczas klonowania DNA.
- Mutacja w genie endA1 obniża aktywność endonukleazy I, powoduje niższy poziom degradacji DNA, tym samym zapewniając szybszy transfer plazmidu.
- Mutacja w genie mcrA powoduje wydajną transformację metylowanego DNA z preparatów genomowych.
- Mutacja w genie hsdR pozwala na wydajną transformację niemetylowanego DNA po amplifikacji PCR.
Opis
Komórki kompetentne JO-FI™ są pochodną szczepu E. coli DH5α™. Szczep nie jest patogenny i został opracowany do klonowania molekularnego (Biohazard level 1).
Porównanie wydajności transformacji
Do transformacji użyto wysokokopijnego plazmidu PUC19 (1 ng) i 50 µl komórek kompetentnych.
JO-FI™ | TOP 10 f' |
Wyniki ligacji
Do ligacji użyto wektora pUC19 trawionego eznymami restrykcyjnymi w miejscu genu lacZ oraz insertu przygotowanego w ten sam sposób z zachowaniem stosunku molowego wektora do insertu 1:3. Transformację przeprowadzono w sposób standardowy, natomiast selekcję rekombinantów uzyskano poprzez wysianie mieszaniny ligacyjnej z komórkami kompetentnymi na podłoże z X-Gal, IPTG.
Końce lepkie
JO-FI™ | TOP 10 f' |
Końce tępe
JO-FI™ | TOP 10 f' |